Masson三色染色法，是最常被使用的染色法之一，傳統的膠原纖維 Collagen fiber染色技術，主要用於膠原纖維與肌肉纖維的鑑別染色，尤其經常被用以觀察組織的纖維化(fibrosis)。
一、原理介紹:
Masson三色染色法，是最常被使用的染色法之一，傳統的膠原纖維 Collagen fiber染色技術，主要用於膠原纖維與肌肉纖維的鑑別染色，尤其經常被用以觀察組織的纖維化(fibrosis)。
Masson三色染色法利用陰離子染料分子的大小和組織間的滲透差異，先以小分子且可抵抗酸性及溶液脫色的
Weigert’s Hematoxyline進入結構致密、滲透性低的細胞核內；隨後以Biebrich Scarlet-Acid Fuchsin可染色嗜酸性組織Acidophilic tissue(肌肉纖維Muscle fiber、細胞質Cytoplasm、角質Keratin etc.)；最後以Aniline blue染色，其分子最大只能
進入結構疏鬆、滲透性高的結締組織(膠原纖維)。
二、染色目標:►膠原纖維Collagen fiber(藍色)
►肌肉纖維Muscle fiber(紅色)
三、染色應用:Masson三色染色法，主要染色標的膠原纖維Collagen fiber，故常被用於腎臟、肺臟與肝臟等組織的纖維化判定依據與
投藥改善的評估方式之一。(ex:肌營養不良症 Muscular dystrophy、心肌梗塞 Myocardial infarction、肝硬化 Cirrhosis、腎絲球纖維化 Glomerular fiborsis、肝及腎之腫瘤等發生纖維化疾病等)。
四、呈色結果:
►黑色－細胞核Nucleus►紅色－肌肉纖維Muscle fiber、細胞質Cytoplasm、角質Keratin etc.
►藍色－膠原纖維Collagen fiber
五、►BioTnA Masson’s Trichrome Stain TASS01 染色步驟 Protocol
1.烤片 65℃，60分鐘或37℃，overnight。
2.脫蠟，Xylene*2，各10分鐘。(或Xylene*3，各7分鐘)3.覆水，99.9(100)%*2，95%*1，85%*1，75*1，各2分鐘。
4.自來水浸泡約5分鐘。5.Bouin’s solution固定以56。C浸泡 1小時
6.Weigert’s Hematoxylin染色8分鐘。7.自來水沖洗10分鐘(避免直沖組織)，轉色。
8. Biebrich Scarlet-Acid Fushsin染色10分鐘。9. Phosphomolybdic acid-phosphotungstic aicd 分色10分鐘。
(使Biebrich Scarlet-Acid Fushsin從膠原蛋白中擴散出來，同時使肌肉呈紅色。)10. Aniline blue 3min 染色3分鐘。
11. 1% Acetic acid 分色15秒。12. 玻片以風冷晾乾
13.Xylene膠封片(尚未封片前，須先置入xylene中。若使用Xylene取代劑時須注意封片膠與取代劑是否可互溶)。※備註：請勿以酒精脫水，會把染好的顏色洗掉。
